Invitrogen™ Stabilized Blood-to-C_T™ Nucleic Acid Preparation Kit for qPCR, compatible with PAXgene™ Blood RNA Tubes

Descripción

The Stabilized Blood-to-C_T™ Nucleic Acid Preparation Kit for qPCR makes it possible to perform expression analysis directly from a 500 μL aliquot of human whole blood collected in PAXgene™ Blood RNA tubes without conventional RNA purification. This simple procedure creates a lysate that can go directly into reverse transcription and real-time PCR with the sensitivity and specificity equivalent to conventionally purified RNA. This kit saves time, generates much less waste, and offers a simple workflow that is suitable for a few samples or can easily be incorporated into automated, high throughput applications.

Para usar con qRT-PCR de 1 y 2 pasos

El kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR permite un análisis directo a partir de una alícuota de 500 μl de sangre humana completa recogida en tubos de sangre Tempus sin la purificación convencional de ARN. Este procedimiento sencillo crea un lisado que puede ir directamente a la transcripción inversa y PCR en tiempo real con la sensibilidad y especificidad equivalente al ARN purificado convencionalmente. Este kit ahorra tiempo, genera muchos menos residuos y ofrece un flujo de trabajo sencillo que puede utilizarse con unas pocas muestras o incorporarse fácilmente a aplicaciones automatizadas de alto rendimiento.

• Detectar ARN total (incluido el miRNA) mediante tubos de ARN sanguíneo Tempus™ sin purificación
• Robusta: robusta de 500 μl procesada a temperatura ambiente con resultados equivalentes a los de ARN purificado
• Las muestras de formato flexible: se pueden preparar en tubos de microcentrífuga o placas de 96 pocillos manuales/automatizadas

Flujo de trabajo sencillo sin sacrificar la sensibilidad y especificidad
El proceso consiste en peletear y lavar una alícuota de 500 μl del tubo de sangre, seguido de un paso único de digestión/ADNasa que preserva la integridad del ARN. La preparación tiene lugar completamente a temperatura ambiente, a diferencia de otros productos que requieren pasos de incubación a una temperatura específica. Se pueden preparar hasta 96 muestras en la mitad del tiempo que tarda la purificación competitiva de columnas de centrifugación en procesar solo 12 muestras, con menos esfuerzo práctico. El lisado resultante puede almacenarse para su uso posterior (1 hora a 4 °C o 5 meses congelado). Este procedimiento sencillo se lleva a cabo en el mismo pocillo de procesamiento de muestras, de principio a fin, lo que significa que no se transfieren las muestras. Los datos de RT-PCR en tiempo real generados a partir del lisado son equivalentes a los resultados obtenidos a partir del ARN purificado convencionalmente de los mismos tubos y se han validado con los siguientes reactivos de qPCR:
• Kit de alta capacidad RNA a ADNc™ Applied Biosystems™ y mezcla maestra de expresión génica TaqMan™
• Kit de síntesis de ADNc Invitrogen SuperScript™ VILO™ y mezcla maestra de expresión génica TaqMan
• Kit para la transcripción inversa de microARN TaqMan Applied Biosystems™ y mezcla maestra universal Taqman™ II Applied Biosystems™
•Kit de mezcla maestra de reactivos RT-PCR en un paso TaqMan
Los reactivos de transcripción inversa para la síntesis de ADNc, las mezclas maestras TaqMan y los ensayos de análisis de PCR en tiempo real TaqMan se venden por separado y no están incluidos en el kit.

El número total de reacciones de transcripción inversa y PCR posibles a partir de una muestra inicial depende de los requisitos mínimos de muestra de los kits de RT-PCR deseados (Consulte la documentación del usuario para obtener más información).

Examinar, descubrir o validar
Para usuarios con genes específicos de interés, el kit de preparación de ácidos nucleicos estables Blood-to-C_T para qPCR se ha diseñado para permitir el cribado rápido a partir de una pequeña cantidad de muestra inicial (aproximadamente el 5 % del volumen total de un tubo de ARN sanguíneo Tempus llenado correctamente por muestra). El resto del tubo de sangre se puede archivar para su uso posterior o purificar según sea necesario.

Quienes realicen experimentos de descubrimiento o validación con análisis RT-PCR en tiempo real ahorrarán esfuerzo, tiempo y costes generales con el kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR, a la vez que se emplea un proceso escalable que permite a los laboratorios superar las dificultades de la purificación convencional y, finalmente, empezar a procesar las muestras con facilidad.

Análisis miARN
Con el creciente énfasis en el ARN no codificado y su papel regulador en el desarrollo y la enfermedad, es tranquilizador saber que estas pequeñas pero importantes moléculas de ARN pueden detectarse correctamente con el kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_T para qPCR. Nuestros científicos han probado el lisado con el kit de transcripción inversa de MicroARN TaqMan Applied Biosystems y la mezcla maestra universal TaqMan II con un gran panel de ensayos de microARN TaqMan y han generado resultados iguales o mejores que los del producto de purificación de miARN de la competencia.

Tamaño reducido y menos residuos = más ahorros
El kit de preparación de ácidos nucleicos estabilizados Blood-to-C_Tpara qPCR simplifica el flujo de trabajo y reduce los residuos plásticos totales en un 75 % (por peso) para un número comparable de muestras procesadas a través de columnas y no genera residuos orgánicos. Tamaño reducido que maximiza la capacidad del congelador.
Para usuarios que necesitan purificación completa: Si todavía se requiere la purificación de ARN convencional para el tubo de sangre remanente, utilice el kit de aislamiento de ARN MagMAX para tubos de sangre estabilizados. Este kit maximiza el la producción de ARN total de los tubos de ARN sanguíneo Tempus mediante tecnología de separación basada en gránulos magnéticos.
Especificaciones:
• Compatibilidad: tubos de ARN sanguínea Tempus
• Tiempo de procesamiento: inferior a 1 hora
• Formato: tubo de microcentrífuga, placas de 96 pocillos
• Número de preparaciones: 200 reacciones

• Menos recursos utilizados, menos peligros y menos residuos

PAXgene™ y PreAnalytiX™ son marcas registradas de PreAnalytiX GmbH. En este documento no se implica ningún patrocinio, promoción o afiliación.

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