Invitrogen™ CyQUANT™ LDH and G6PD Cytotoxicity Assays

Description

CyQUANT cytotoxicity assays provide a simple and reliable method to assess chemical or cell-mediated cellular toxicity. The CyQUANT LDH Cytotoxicity Assays and the CyQUANT Cytotoxicity Assay (G6PD Release Assay) use colorimetric- or fluorescence-based detection to measure the release of cytosolic enzymes (LDH or G6PD) from damaged cells. These cytotoxicity assays are optimized for use on microplate readers and can be used for continuous monitoring of cell health over time since cell lysis is not required, making them versatile tools for high-throughput screening and drug discovery applications.

El kit de ensayo de citotoxicidad de LDH CyQUANT™ es un ensayo colorimétrico que proporciona un método sencillo y fiable para determinar la citotoxicidad celular. La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima citosólica presente en varios tipos de células diferentes que se libera en el medio de cultivo celular tras el daño a la membrana plasmática. El kit de ensayo de citotoxicidad de LDH CyQUANT proporciona los reactivos para medir de forma precisa y cuantitativa esta LDH extracelular.

El kit de ensayo de citotoxicidad de LDH CyQUANT™ ofrece las siguientes ventajas:

• Practicidad: formato de ensayo de adición, mezcla y lectura para células adherentes y en suspensión, incluidos los modelos de células 3D
• Exactitud: proporciona una medición cuantitativa de la liberación de LDH.
• Flexibilidad: ideal para la detección de alto rendimiento, permite controlar la citotoxicidad de la misma muestra a lo largo del tiempo.
• Robusto: utiliza la actividad enzimática del LDH estable como marcador citotóxico.

La LDH es una enzima citosólica presente en varios tipos de células diferentes y es un indicador bien establecido y fiable de la toxicidad celular. El daño de la membrana plasmática produce una liberación de LDH en el medio de cultivo celular circundante. Esta LDH extracelular puede cuantificarse mediante una reacción enzimática acoplada en la que la LDH cataliza la conversión de lactato de piruvato mediante la reducción de NAD+ en dinucleótido de nicotinamida (NADH). A continuación, la diaforasa utiliza el NADH para reducir una sal de tetrazolio (INT) a un producto de formazán rojo que se puede medir a 490 nm. El nivel de formación de formazán es directamente proporcional a la cantidad de LDH que pasa al medio.

El kit de ensayo de citotoxicidad de LHD CyQUANT™ proporciona los reactivos necesarios para una cuantificación colorimétrica simple y fiable de la citotoxicidad celular. El kit se puede utilizar con diferentes tipos de células, incluidos los modelos de células 3D, para medir la citotoxicidad mediada por compuestos químicos, así como la citotoxicidad mediada por células. Dado que la LDH en el medio es el indicador de citotoxicidad celular, el ensayo puede utilizarse para controlar la citotoxicidad de la misma muestra a lo largo del tiempo. Para realizar el ensayo, se transfiere una alícuota del medio de cultivo celular a una placa nueva y se añade la mezcla de reacción. Tras una incubación de 30 minutos, la reacción se detiene cuando se añade la solución de parada y la absorbencia se mide con un lector de microplacas.