Invitrogen™ Ensayo de proliferación celular CyQUANT™ NF

Descripción

Since the amount of DNA in cells is highly regulated, methods to detect DNA content offer improved accuracy over metabolism-based cellular proliferation or cytotoxicity assays, which can be affected by cell changes that are unrelated to cell number. CyQUANT cell proliferation assays use cell-permeant, DNA-binding dyes that enhance fluorescence when bound to nucleic acids to measure cellular DNA content. The resulting fluorescent signal can be compared to standards to determine cell number, enabling fast and sensitive microplate assays to measure cell proliferation and cytotoxicity.

El ensayo se compone de una sonda fluorescente roja de unión a ADN que penetra en células y un supresor de fondo que no penetra en la célula. La sonda y el supresor se mezclan y se agregan a las células; la sonda tiñe todas las células, mientras que el supresor solo entra en las células muertas o células con membranas celulares comprometidas, lo que suprime la fluorescencia de la sonda en esas ubicaciones. El resultado es que solo se detectan células sanas.

Características de los ensayos de proliferación células CyQUANT Direct Red:

• Prácticos: no requieren lavado, ni lisis celular ni equilibrio de la temperatura; solo hay que añadir y leer para detectar cambios en la proliferación de células adherentes y en suspensión
• Exactos: se basan en la cantidad de ADN celular, que está muy regulada y es independiente del estado metabólico de las células
• Sólidos: la sonda fluorescente roja y el supresor de fondo optimizados dan como resultado un ensayo de alta sensibilidad con un amplio rango dinámico
• Estables: estabilidad de señal fluorescente roja durante siete horas, perfecto para ensayos de detección de gran envergadura
• Habilitados para multiplex: se pueden combinar con lecturas fluorescentes o luminiscentes de distintos espectros

El ensayo CyQUANT Direct es un ensayo de citotoxicidad y proliferación que se basa en fluorescencia roja para lectores de microplacas con un rango de detección lineal de menos de 100 a 20.000 células por pocillo para la mayoría de los tipos de células. El ensayo de adición, mezcla y lectura sin necesidad de lavado se puede completar en una hora. La excitación fluorescente roja y las longitudes de onda de emisión dan como resultado un ensayo perfecto para multiplexar con proteínas o colorantes fluorescentes verdes. Además, la señal fluorescente es estable durante varias horas, para aportar mayor comodidad en el flujo de trabajo.

Dado que la cantidad de ADN en las células está muy regulada, los métodos de detección basados en la determinación de la cantidad de ADN son muy exactos. El ensayo de proliferación celular CyQUANT Direct Red se compone de una sonda fluorescente roja de unión a ADN que penetra en la célula y un colorante supresor de fondo. La sonda y el supresor se mezclan, se agregan a las células, se incuban durante una hora y, a continuación, se mide la fluorescencia. La sonda entra en todas las células, pero el supresor solo entra en las células muertas o células con membranas comprometidas. Al entrar en las células muertas y moribundas, el colorante supresor de fondo suprime la señal de la sonda fluorescente, lo que resulta en la detección de solo células sanas. Por lo tanto, el ensayo CyQUANT Direct Red puede usarse para medir los cambios en la proliferación, así como la citotoxicidad.