Thermo Scientific™ LweI (SfaNI) (10 U/μL)

Descripción

ADN lambda digerido con LweI (SfaNI), agarosa al 1,4 %, 169 sitios de escisión

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

5'..G C A T C (N)₅▵...3'

3'..C G T A G (N)₉▵...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón Tango™: 33 mM de Tris-acetato (pH 7,9 a 37 °C), 10 mM de Mg-acetato, 66 mM de K-acetato y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento:

• LweI se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH de 7,5 a 25 °C), 100 mm de KCl, 1 mm de DTT, 0,1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CPG: puede solaparse, reducción de fragmentación
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: puede solaparse, efecto sin determinar.

Nota:

LweI puede permanecer asociada al ADN fragmentado, lo que puede provocar un desplazamiento de las bandas de ADN durante la electroforesis. Para evitar patrones atípicos de las bandas de ADN, use colorante de carga de ADN 6X y solución SDS para la preparación de muestras o caliente el ADN digerido en presencia de SDS antes de la electroforesis. Se necesitan al menos dos copias de la secuencia de reconocimiento de LweI para que la fragmentación sea eficaz.