Thermo Scientific™ S1 Nuclease (100 U/μl)

Descripción

S1 Nuclease degrada los ácidos nucleicos monocatenarios, liberando 5'-fosforil mono u oligonucleótidos. Es cinco veces más activo en el ADN que en el ARN. S1 Nuclease también disocia el ADN doble cadena en la región monocatenaria provocada por una mella, brecha, discordancia o por un bucle. S1 Nuclease muestra actividad 3'-fosfomonoesterasa.

La enzima es una glicoproteína con un contenido en carbohidratos del 18 %.

• Fuente: Aspergillus oryzae
• Peso molecular: Monómero de 29 kDa

• Ausencia de actividad contaminante de nucleasas específicas de ADN bicatenario confirmada por una prueba de calidad adecuada
• Probado funcionalmente para la generación de deleciones unidireccionales en fragmentos de ADN (junto con Exonuclease III)

• Aspergillus oryzae

• Monómero de 29 kDa

• Una unidad de la enzima produce 1 μg de desoxirribonucleótidos solubles en ácido en 1 min. a 37 °C.
• La actividad enzimática se analiza en la siguiente mezcla: 30 mM de acetato de sodio (pH 4,5), 50 mM de NaCl, 0,1 mM de ZnCl₂, 5 % (v/v) de glicerol, 800 μg/ml de ADN de timo de ternero desnaturalizado por calor

• La enzima se suministra en: 20 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 50 mM de NaCl, 0,1 mM de ZnCl₂ y 50 % (v/v) de glicerol

• 200 mM de acetato de sodio (pH 4,5 a 25 °C), 1,5 M de NaCl y 10 mM de ZnSO₄

• Inhibidores: queladores metálicos, PP_i, P _i, 5'-ribonucleótidos y desoxirribonucleótidos
• Inactivado por calor a 70 °C durante 10 min. en presencia de EDTA

Recomendada para:

Eliminación de salientes monocatenarios de fragmentos de ADN (2); asignación de transcripciones de S1 (3, 4); disociación de horquillas; creación de eliminaciones unidireccionales en fragmentos de ADN junto con la exonucleasa III (5)

Nota:

S1 Nuclease puede introducir fisuras en el ADN bicatenario, en el ARN y en los híbridos ADN/ARN en concentraciones enzimáticas elevadas y concentraciones bajas de sal (6).