Thermo Scientific™ SatI (Fnu4HI) (10 U/μL)

Descripción

ADN lambda digerido con SatI (Fnu4HI), agarosa al 1,4 %, 380 sitios de escisión

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

3'...C G N▵C G...5'

Condiciones para una actividad del 100 %

• 1 tampón G:10 mm de Tris-HCl (pH 7,5 a 37 °C), 10 mm de MgCl₂, 50 mm de NaCl y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento

• Satl se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 100 mm de KCl, 1 mm de DTT, 1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y refragmentación

• Tras una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de SatI, más del 60 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse en una mezcla de reacción con 10-30 u de ligasa de ADN T4/1 μg de fragmentos y 10 % de PEG
• Más del 90% de estos se pueden recortar

Efectos de metilación

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CpG: puede solaparse, bloqueada.
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: nunca se solapa, sin efecto.

Extremos compatibles

• GC^SGC — BcnI, Bme1390I
• GC^WGC — MvaI, Bme1390I

Nota:

Se necesitan al menos dos copias de la secuencia de reconocimiento de SatI (Fnu4HI) para que la fragmentación sea eficaz.