Thermo Scientific™ Mutation Generation System Kit

Descripción

Los productos de transposón se basan en la maquinaria de transposición del bacteriófago Mu. Durante la fase lítica del ciclo vital del fago, la maquinaria replica su genoma transponiendo repetidamente dentro del genoma del huésped. La reacción de transposición de Mu ha sido modificada en una reacción in vitro catalizada por una sola enzima, la transposasa MuA. En este sistema, una reacción in vitro es capaz de generar más de un millón de clones de inserción de transposón.

Características destacadas

El sistema de generación de mutaciones (MGS Kit) y el sistema Stop Generation (STOP Kit) se desarrollaron para el análisis funcional de proteínas. Estas nuevas herramientas de transposón permiten la creación de bibliotecas saturadas de proteínas mutadas en una sola reacción con menos tiempo de intervención que cualquier otro método. La ubicación de la inserción de transposón en cada clon mutado se puede mapear mediante PCR o secuenciación. Con los kits MGS y STOP, miles de clones mutados están listos para estudios de expresión en solo 2 a 3 días.

El kit MGS contiene el conjunto completo de reactivos para la mutagénesis de exploración enlazadora basada en transposón de cualquier proteína objetivo. Los MGS Entranceposons están diseñados para realizar cambios sutiles en la estructura de una proteína objetivo mediante la inserción de 15 bp en el marco de los linkers en todo el gen objetivo correspondiente. Esta inserción en el marco permite la conservación de secuencias de flujo descendente.

Los Entranceposons del STOPKit contienen codones de parada traslacionales en los tres marcos de lectura dentro de la porción terminal de la secuencia de transposon. La modificación patentada del sistema Stop Generation permite generar una biblioteca de deleción C-terminal saturada a partir de prácticamente cualquier proteína objetivo con una adición máxima de tres aminoácidos.

Características destacadas

• Eficiente - Crea bibliotecas de inserción saturadas para secuenciación y análisis de proteínas en una sola reacción
• Rápido: Reduce el tiempo de intervención en comparación con los métodos convencionales
• Aleatorio: Elimina la preferencia de sitio de destino o el punto de acceso directo de inserción