Invitrogen™ Kit de ELISA para AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] humana

Descripción

El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón y rata. El ensayo reconoce la AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] humana tanto natural como recombinante. Principio del método Se ha recubierto un ac de captura monoclonal específico para AMPK alfa 1,2 (fosforilada) [pT172] en los pocillos de la placa de 96. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al ac inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un ac de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como ac de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado como HRP. Esto se une al ac de detección para completar la estructura tipo sandwich. Después de una tercera incubación y lavado de la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína diana presente en la muestra original y el D.E. puede leerse en un lector de microplacas. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad como sensibilidad, especificidad, precisión y consistencia entre lotes. Consulte el manual para la validación.

La AMPK es un complejo heterotrimérico compuesto por una subunidad alfa catalítica y subunidades beta y gamma reguladoras. Protege a las células de las tensiones que provocan el agotamiento del ATP al desactivar las vías biosintéticas que consumen ATP. La AMPK se activa mediante AMP alto y ATP bajo a través de un mecanismo que implica regulación alostérica, la promoción de la fosforilación por una proteína cinasa de flujo ascendente conocida como cinasa AMPK y la inhibición de la desfosforilación. La AMPK activada puede fosforilar y regular in vivo hidroximetilglutaril-CoA reductasa y acetil-CoA carboxilasa, que son enzimas reguladoras clave de la síntesis de esterol y la síntesis de ácidos grasos, respectivamente. Los genes humanos AMPK alfa1 y AMPK alfa2 codifican una proteína de 548 aminoácidos y una proteína de 552 aminoácidos, respectivamente. La AMPK beta1 humana codifica una proteína de 271 aminoácidos y la AMPK beta2 humana codifica una proteína de 272 aminoácidos. El gen humano AMPK gamma1 codifica una proteína de 331 aminoácidos. La AMPK gamma2 y la AMPK gamma3 humanas, que son proteínas de 569 y 492 aminoácidos, respectivamente, contienen dominios N-terminales únicos y pueden participar directamente en la unión de AMP dentro del complejo AMPK.

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo