Thermo Scientific™ Solución de DNasa I (1 unidad/μl), sin ARNasa

Descripción

La desoxirribonucleasa I (ADNasa I) es un polipéptido glicosilado único que degrada el ADN mono y bicatenario no deseado. Las enzimas trabajan para dividir el ADN en fragmentos de fosfodinucleótido de 5' y fragmentos pequeños de oligonucleótido. La ADNasa se agrega con frecuencia a los reactivos de lisis celulares para eliminar la viscosidad que genera el contenido del ADN en los lisados de células bacterianas o para eliminar las plantillas de ADN de los ARN producidos por la transcripción in vitro. Se ofrecen dos grados de ADNasa: uno que es suficiente para las aplicaciones con proteínas y otro que resulta útil para cualquier aplicación que requiera la digestión del ADN, en la que es crucial evitar dañar el ARN.

Características destacadas:

• Degrada y elimina el ADN no deseado de las muestras
• Divide tanto el ADN monocatenario como el bicatenario
• Compatible con reactivos de lisis celular Thermo Scientific Pierce
• Reduce la viscosidad de los lisados celulares bacterianos (extractos de proteínas) para facilitar las labores de pipeteo
• Se suministra como 50 % de glicerol en 10 mM de Tris-HCl a pH 7,5, 10 mM de CaCl₂, 10 mM de MgCl₂
• Disponible en dos cómodos formatos: Probado con ARNasa para proteger el ARN (referencia 89836) y grado de extracción de proteínas adecuado (referencia 90083)

• Se requieren iones de calcio para la actividad de la ADNasa y es posible que haya trazas de Ca++ en concentraciones lo suficientemente grandes como para que la ADNasa I esté activa; sin embargo, el uso de EGTA o de tampones sin calcio pueden reducir la actividad de la ADNasa I a niveles indetectables
• Niveles altos (es decir, 100 mm) de iones monovalentes como Na+ y K+ disminuirán la actividad de la ADNasa I
• La ADNasa I se inactiva cuando se calienta a 65 °C durante 10 minutos.
• Unidad Kunitz: 1 unidad Kunitz es la cantidad de enzima necesaria para causar un incremento de absorbencia de 0,001 a 260 nm/min/ml a 25 °C en 0,1 M de NaOAc, pH 5.0 debido a la degradación de ADN altamente polimerizado.
• Unidades de ensayo de degradación: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para degradar completamente 1 mg de ADN plasmídico en 10 minutos a 37 °C en 10 mm Tris-HCl, pH 7.5, 50 mm MgCl₂, 13 mm CaCl₂

• Visual: Líquido transparente
• Concentración: 1 unidad/ml
• Actividad: ≥ 100.000 unidades/mg de proteína
• Contaminación de ARNasa: 20 unidades liberan < 2 % de no etanol precipitable cuando se incuba con ARN Poly(A) marcado con 3H.
• Análisis funcional: 1 μl de enzima degrada < 5 % de ARN pero degrada el 100 % de ADN.

• Visual: Líquido transparente e incoloro libre de material no soluble.
• Unidades ≥2500 unidades/ml
• Definición de la unidad: 1 unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para producir un aumento en la absorbencia sobre 260 nm de 0,001/min/ml a 25 °C de ADN altamente polimerizado

• Eliminación de viscosidad causada por ADN en lisados celulares de proteínas
• Eliminación de plantillas de ADN procedentes de ARNs producidos por transcripción in vitro